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微孔滤膜抽滤法对次氯酸钠消毒水效果的检测

[导读]采用微孔滤膜抽滤法,检测次氯酸钠对水中大肠杆菌的杀灭效果

    用抽样活菌计数法检测水消毒效果,容易漏检水中少量存活菌,为准确检测水消毒效果,以有效氯含量为79.3g/L的次氯酸钠对水中细菌进行了杀灭实验,用微孔滤膜抽滤法对水中大肠杆菌杀灭效果进行检测

   采用悬液定量测定实验,实验菌为大肠杆菌,实验有效氯含量为60mg/L,作用时间为一分钟,实验设备八组:消毒剂+菌悬液;消毒剂+菌悬液+中和剂;中和剂+菌悬液;消毒剂+中和剂+菌悬液;正常菌对照;未加菌磷酸盐缓冲液对照;未加菌中和剂对照;未接种菌的培养基对照。实验结果:当第6、7、8组不长菌,第3、4、5组组间菌数误差率小于10%,第1组不长菌或长菌量远少于第2组菌量超过100cfu/ml时,为所选中和剂及其浓度适宜。

   选用孔径为0.45μ的微孔滤膜,滤膜大小直径为50mm,滤器型号为T-50,滤杯为1L(天津津腾实验设备有限公司),实验前将滤膜置于蒸馏水煮沸3次,每次十五分钟灭菌,滤器用酒精火焰烧灼灭菌。

   实验菌为大肠杆菌,去37摄氏度 24小时新鲜斜面培养物,用0.03mol/L无菌磷酸盐缓冲液洗下,并用蒸馏水稀释成菌悬液。实验时,将配置好的菌悬液1ml加入到100ml含消毒剂的水样中混匀,作用到预定时间,向菌药混合液中加入中和剂混匀,即混合液中和剂的含量为1g/L硫代硫酸钠,中和10分钟,采用微孔滤膜抽滤法将全部作用水样经滤膜抽滤,过滤后将滤膜帖附在品红亚硫酸钠琼脂培养基上,37摄氏度培养24小时进行菌落计数,阳性对照将1ml菌悬液加入到100mlPBS中,稀释后过滤培养计数,阴性对照直接将100mlPBS过滤培养计数。

   实验表明,有效氯含量分别为15ml/L和10ml/L时,作用五分钟和七分钟,可使水样中大肠杆菌降至0cuf/100ml.在水样中加入腐殖酸,色度为10度和15度时,要求有效氯含量分别为15ml/L和20ml/L,作用五分钟和三分钟,才能使大肠杆菌降至0cfu/100ml。据报道采用悬液法,有效氯含量为25ml/L作用15分钟,对大肠杆菌的杀菌率为100%,此结果远不如微孔滤膜抽滤法检测的效果好,这可能是悬液法每次接种样量只有0.5-1.0ml,对水中少量存活菌漏检有关,因微孔滤膜抽滤法每次检样量为100ml,是平皿接种法的100-200倍。

   《生活饮用水卫生规范》2001年版细菌学指标规定,总大肠杆菌为没100ml水样中不得检出,采用微孔滤膜抽滤法,观察消毒液中对水中细菌的杀灭效果,待含消毒剂的水样和细菌作用至规定时间,加入高浓度的中和剂中和后,可将全部作用水样过滤计数,克服了悬液定量杀灭实验需经稀释后取部分检样计数的缺点,所以采用微孔滤膜法所得结果准确、科学,安全性较高。

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